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厭氧培養箱的安裝和使用

  • 更新日期:2022-08-03      瀏覽次數:882
    • 安裝
      1.整機應安放在溫差較小、操作方便的位置,應避免陽(yáng)光直曬和遠離采暖設備,放置平穩;
      2.將混合氣瓶、氮氣瓶安放平穩,并分別裝好減壓閥(含壓力表),安置在適當位置;
      3.接上氣路并檢查氣路,為防止漏氣,必要時(shí)可在各接管處用密封膠粘合;
      使用
      (一)操作室厭氧環(huán)境形成:
      1.按使用要求放置好必要的附件和器具;
      2.通電源開(kāi)照明燈,開(kāi)溫控儀,調節所需溫度;
      3.操作室內放入1000g鈀粒(封閉)和500g干燥劑,并放入美蘭指示紙(封閉);
      4.關(guān)緊取樣室內外門(mén),并抽真空校驗;
      5.操作室內*次置換(氮氣置換):
      A.把乳膠手套套在觀(guān)察板法蘭圈上并扎緊
      B.接通氮氣進(jìn)氣路,打開(kāi)氮氣控制閥1,使手套鼓起,關(guān)閉閥門(mén)1,然后扎緊袋口;
      6.操作室第二次置換(氮氣置換)重復一次充氮過(guò)程,取樣室先抽真空,并注意隨時(shí)用腳踏開(kāi)關(guān)開(kāi)閉排氣。如此連續三次氮氣置換。
      7.操作室第四次置換(混合氣體置換):
      (混合氣體配比為N2 85%、H2 10%、CO2 5%)
      A.調換氣路打開(kāi)混合氣閥3進(jìn)氣,充氣時(shí)取樣室先抽真空,并隨時(shí)用腳踏開(kāi)關(guān)開(kāi)閉排氣;
      B.關(guān)掉混合氣體閥3,并打開(kāi)閥5,使混合氣體經(jīng)過(guò)流量計,調整流量計,流量為每分鐘10ml左右;
      C.混合氣體重復2-3次轉換,經(jīng)過(guò)上述過(guò)程,基本形成厭氧環(huán)境。
      8.操作室內打開(kāi)粑粒除氧劑,接通除氧催化器電源進(jìn)行催化除氧,一小時(shí)后打開(kāi)美蘭指示紙觀(guān)察其變色情況,不變色為操作室內達到厭氧環(huán)境;
      9.開(kāi)紫外線(xiàn)滅菌燈,室內進(jìn)行滅菌處理,滅菌時(shí)間按具體實(shí)驗自定。
      (二)菌種的置入和培養:
      1.檢查取樣室內門(mén)并關(guān)緊;
      2.打開(kāi)取樣室外門(mén),將菌種放入取樣室后即關(guān)上外門(mén);
      3.取樣室充氮置換三次過(guò)程:打開(kāi)真空泵,先抽真空度500ml汞柱(66kPa)以上停,然后人工打開(kāi)氮氣閥2進(jìn)氣,使指針回復零位,關(guān)掉閥2。第二次重復操作一次。第三次操作時(shí),使真空度500ml汞柱(66kPa)以上停,然后打開(kāi)閥4進(jìn)混合氣,使指針回復零位,關(guān)掉閥4。取樣室充氮置換三次過(guò)程結束;
      4.如選定真空度較低就需要增加置換的次數;
      5.取樣室外門(mén)開(kāi)啟、關(guān)緊,再抽低真空度100ml汞柱(13kPa)檢驗;
      6.厭氧培養箱需要長(cháng)期連續使用的條件:
      A.每天在操作室內打開(kāi)美蘭指示紙觀(guān)察,如不正常就重新?lián)Q氣;
      B.要長(cháng)期連續輸入微量的混合氣體,使補進(jìn)的氮氣能和微量的氧結合通過(guò)催化吸收,保證室內厭氧狀態(tài),補入混合氣流量選定為每分鐘10ml左右;
      C.連續培養運行一天,更換一次除氧劑和干燥劑。
      D.操作室內溫度可任意選擇和控制。
      7.混合氣瓶、氮氣瓶輸出壓力調整:調節減壓閥,使輸出壓力0.1Mpa左右。

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